技术服务

兔源Fab抗体筛选

兔源抗体文库简介

在诸多抗体种类中,兔单克隆抗体是特异性和亲和力较高的抗体类型。兔单抗KD多在10-9-10-11M,甚至能达到到10-12M。并且兔的免疫细胞会经过二次成熟阶段,相对于鼠单抗,兔单抗具有更高的多样性,从而大大增加筛选出目标抗体的成功率,尤其是针对一些难度抗原。

 

与鼠单克隆抗体相比,兔单克隆抗体具有更高的亲和力和特异性、可识别更多表位、可识别小鼠抗原等优点,兔子通过与小鼠和人类不同的免疫机制产生抗体库,可对外来抗原产生强烈的免疫反应,且对免疫原性较弱的小分子、半抗原同样适用。人和小鼠通过VJ和VDJ基因重排来创建抗体库,再通过体细胞超突变(SHM)进一步多样化。兔子除了SHM机制外,还可以通过体细胞基因转换(SGC)引入额外的抗体多样性

 

兔单克隆抗体具有高亲和力、高特异性和高灵敏度,能够识别更多新型表位,并且容易进行人源化。这些特点使得兔单克隆抗体在抗体药物开发中具有广阔的前景。

 

首个兔源scFv单抗药物BEOVU获得FDA批准,用于治疗湿性老年黄斑变性(AMD),而BEOVU是由Epitomics公司开发的VEGF兔抗体经过转让、优化和收购,最终演变而来。此外,另一家兔单抗药物研发公司Alder于2019年9月被灵北制药以19.5亿美元的价格收购,并在2020年2月上市了全球第二款兔抗体药物Vyepti,用于预防性治疗成人偏头痛。兔单抗药物的上市,揭开了抗体药物研发的新篇章,发展潜力不可限量。


兔源抗体优势

结构稳定: 90-95%的轻链为κ1,κ1的链内二硫键让轻链结构更稳定。

亲和力高:抗体KD值达10-12M,亲和力是常规抗体的10-100倍。

识别精准:识别小分子(< 600 Da)、PTM、单氨基酸取代等细微的表位变化。

多样性丰富:非近交品系繁殖,亲和力成熟时间长,SGC、SHM多样性机制相结合。

免疫应答强:对小分子抗原、半抗原可产生强烈免疫反应。


兔抗体结构图示

其中K1的抗体结构中,VK与CK之间有一对二硫键


技术服务流程

兔源Fab抗体筛选服务流程

服务流程

内容

周期

交付

抗原分析

沟通靶点基本信息

设计筛选方案

1. 交付30+unique抗体序列

2. 抗体筛选实验报告

3. 抗体序列DNA及氨基酸文件

4. 含抗体序列的质粒

5. 表达5株抗体1mg

6. 抗体表达及检测数据报告

抗原接收

收到抗原确认信息

启动筛选

抗体筛选

进行3-4轮文库淘选

挑取单克隆进行ELISA检测及假阳性鉴定

2-3周

序列分析

挑选阳性克隆测序

分析测序结果

形成unique抗体DNA及氨基酸序列文件

1周

抗体表达

构建表达载体

转染真核细胞生产抗体

抗体蛋白质量检测

2周

抗体活性检测

抗体水平ELSIA检测结合活性

1周