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sdFv抗体介绍
抗体药物分子的研发,从最早期的全长单克隆抗体发展至今经历了多次的结构演变,诸如Fab,scFv,驼源VHH等,分子量从150KD缩小为15KD,以获取更好的渗透能力,适应更多的治疗机制需求,半衰期控制,双特异抗体设计等。在
故创新性的将天然人源的完整抗体,拆分为单个重链,单个轻链的新型抗体分子模式(结构类似VHH抗体),运用于噬菌体展示体系,构建了大容量的SdFv单结构域全人源抗体文库。VH、VK、VL可变区片段单独成库,更多的纳米类型,更广泛的抗体多样性。
工程抗体结构示例
sdFv的结构类似于驼源纳米抗体sdAB/VHH,由完正抗体拆分出来的可变区基因单独形成结构域,故称sdFv。
sdFv抗体特点
1. sdFv来源于天然全人源抗体序列,经历体内成熟过程,免疫源性极低。
2. sdFv分为3种类型,VH,VK,VL,多样性丰富。
3. 分子大小与驼源VHH纳米抗体相当,更强的渗透能力。
4. 单个可变区形成单结构域抗体,独特结构的表位的识别能力强于传统结构抗体。
文库案例
全人源抗体文库构建PCR扩增电泳展示
全人源PBMC总RNA提取
全人源sdFv抗体库构建第1轮PCR
调取扩增VH和VL基因片段
全人源sdFv抗体库构建第2轮PCR
sdFv文库构建1份PBMC可构建3种类型文库(VH、VK、VL)
序列分析
文库序列进化树及文库序列比对
sdFv抗体文库中VH多样性最高,VL多样性次之,VK多样性第三
技术服务流程
天然人源sdFv抗体文库定制服务流程 | |||
服务流程 | 内容 | 周期 | 交付 |
沟通文库信息 | 确定文库多样性 文库库容大小 | — | 1.文库构建实验报告 (包含文库质量参数等文件) 2.抗体文库库容>1×10^9 3. 抗体文库总滴度>1×10^14 4. 细菌库10ml
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PBMC采集 | 客户提供PBMC 或古格尔提供 | — | |
抗体文库构建 | 提取RNA 扩增抗体可变区片段 构建文库质粒 电击转化细菌 生产抗体文库 | 3周 | |
文库质量检测 | 库容大小 文库滴度 插入率 测序分析序列多样性 |
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