技术服务

全人源纳米抗体库定制

sdFv抗体介绍

抗体药物分子的研发,从最早期的全长单克隆抗体发展至今经历了多次的结构演变,诸如Fab,scFv,驼源VHH等,分子量从150KD缩小为15KD,以获取更好的渗透能力,适应更多的治疗机制需求,半衰期控制,双特异抗体设计等。在

故创新性的将天然人源的完整抗体,拆分为单个重链,单个轻链的新型抗体分子模式(结构类似VHH抗体),运用于噬菌体展示体系,构建了大容量的SdFv单结构域全人源抗体文库。VH、VK、VL可变区片段单独成库,更多的纳米类型,更广泛的抗体多样性。

 


工程抗体结构示例

sdFv的结构类似于驼源纳米抗体sdAB/VHH,由完正抗体拆分出来的可变区基因单独形成结构域,故称sdFv。


sdFv抗体特点

1. sdFv来源于天然全人源抗体序列,经历体内成熟过程,免疫源性极低。

2. sdFv分为3种类型,VH,VK,VL,多样性丰富。

3. 分子大小与驼源VHH纳米抗体相当,更强的渗透能力。

4. 单个可变区形成单结构域抗体,独特结构的表位的识别能力强于传统结构抗体。


文库案例

全人源抗体文库构建PCR扩增电泳展示

全人源PBMC总RNA提取


全人源sdFv抗体库构建第1轮PCR

调取扩增VH和VL基因片段


全人源sdFv抗体库构建第2轮PCR

sdFv文库构建1份PBMC可构建3种类型文库(VH、VK、VL)


序列分析


文库序列进化树及文库序列比对

sdFv抗体文库中VH多样性最高,VL多样性次之,VK多样性第三


技术服务流程

天然人源sdFv抗体文库定制服务流程

服务流程

内容

周期

交付

沟通文库信息

确定文库多样性

文库库容大小

1.文库构建实验报告

(包含文库质量参数等文件)

2.抗体文库库容>1×10^9

3. 抗体文库总滴度>1×10^14

4. 细菌库10ml

 

PBMC采集

客户提供PBMC

或古格尔提供

抗体文库构建

提取RNA

扩增抗体可变区片段

构建文库质粒

电击转化细菌

生产抗体文库

3周

文库质量检测

库容大小

文库滴度

插入率

测序分析序列多样性