驼源纳米抗体筛选

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小分子半抗原简介

通常靶点的分子量较小（<1000 Da），将其称为小分子半抗原，原因在于其分子量小、结构简单、单独存在时无法诱导免疫应答反应，即不具备免疫原性。只有将小分子半抗原与大分子蛋白质连接（或者非抗原性等载体）形成小分子-载体复合物，才可获得免疫原性，可诱导免疫应答。

通常做法是连入载体蛋白合成小分子-载体蛋白复合体，形成免疫原性。

小分子抗原设计图示

小分子抗原设计的要点：

1. 结构修饰：小分子抗原结构过于简单，通常含有环状结构或侧链结构的特征更容易制备出特异性抗体。同时结构简单的小分子需要通过化学修饰引入活性基团（如羧基、氨基），便于与载体蛋白偶联。

2. 维持抗原表位：小分子结构小巧，需要考虑改造后关键表位得到保留，维持免疫识别特性。通常做法是在小分子和载体蛋白之间加入连结臂，其中的连接位点、和小分子的特征基团的避免接近、连结臂的免疫原性是主要的考虑要点。

纳米抗体优势

小分子作为抗原时，由于分子量小，结构较为简单，形成的空间结构有限，通常的传统抗体往往由于分子量大、CDR区结构域大，难以有效识别小分子；而纳米抗体分子量为正常抗体的1/10，分子量小空间位阻小，更易于接触小分子，同时纳米抗体的CDR3区的长度远高于正常抗体中重链的CDR区长度，因而其形成的loop环结构更长更复杂，可以发现及深入常规抗体难以涉及的复杂标为，成为小分子抗原筛选的一大优势。

驼源纳米抗体与人源抗体重链CDR3区氨基酸长度统计图示

数据显示驼源纳米抗体CDR3区的氨基酸长度中位数位于18aa，比常规抗体的CDR3区的长度更长

古格尔生物自主构建了大容量驼源VHH纳米抗体文库，500+多样性丰富，纳米抗体其已知的最小抗体分子和独特的抗原识别区结构，能更好的识别结合结构细小的小分子半抗原。

技术服务流程

小分子半抗原驼源纳米抗体筛选服务流程
服务流程	内容	周期	交付
小分子半抗原分析	沟通靶点基本信息确定抗原设计方案筛选方案设计	—	1. 交付10+unique抗体序列 2. 抗体筛选实验报告 3. 抗体序列DNA及氨基酸文件 4. 含抗体序列的质粒 5. 表达5株VHH抗体1mg 6. 抗体表达及检测数据报告
抗原制备	小分子偶联载体抗原制备	2-3周
抗体筛选	进行3-4轮文库淘选挑取单克隆进行ELISA检测及假阳性鉴定	2-3周
序列分析	挑选阳性克隆测序分析测序结果形成unique抗体DNA及氨基酸序列文件	1周
抗体表达	构建表达载体转染真核细胞生产抗体抗体蛋白质量检测	2周
抗体活性检测	抗体水平ELSIA检测结合活性	1周