技术服务

抗体亲和力成熟

亲和力成熟简介

生物分子由于适应症或治疗机制的不同需求,分子对靶标的亲和能力可能不足,难以满足设计要求,此时需要对分子进行亲和力提升。抗体分子的亲和力由可变区中的CDR决定,尤其是重链的CDR3区,针对这一区域的优化方案一般有丙氨酸扫描,单位点饱和突变,多位点组合饱和突变等,通过建立突变文库,筛选出阳性分子,与benchmark进行比较,通常可提升亲和力10-1000倍左右。

亲和力成熟常用方案


技术服务流程

抗体亲和力成熟服务流程

服务流程

内容

周期

交付

设计突变文库

提供抗体分子序列

确定突变区域及位点

1. 提供1-2株最优亲和力抗体蛋白1mg

2. 文库设计方案及实验报告

3. 亲和力优化的抗体序列文件

4. 亲和力优化的抗体序列质粒

基因合成

合成线性突变文库

4-6周

突变文库构建

构建文库质粒

电击转化细菌

生产抗体文库

1周

抗体筛选

进行3-4轮文库淘选

挑取单克隆ELISA

与亲本抗体比对亲和力排序

2周

抗体生产

基因合成

质粒构建

转染表达

2周

亲和力检测

SPR/BLI等仪器检测

比对亲本亲和力

1周