技术服务
天然全人源抗体发现 + -
天然全人源纳米抗体发现 + -
驼源纳米抗体发现 + -
非抗体支架蛋白Affimer发现 + -
高亲和力兔源抗体发现 + -
抗独特型抗体发现 + -
小分子半抗原抗体发现 + -
全人源纳米抗体VHH发现 + -
分子优化改造服务 + -
分子表达评价服务 + -
噬菌展示技术平台服务 + -
特色技术平台服务 + -
羊驼免疫服务
羊驼为纳米抗体开发免疫常用物种,具有体型小巧,易于操作等优点。由于早期纳米抗体的发现及研究集中国外,多数免疫及药物研发都使用羊驼作为纳米抗体开发的选择,同时羊驼相比我国资源丰富的骆驼,其主要来源自国外进口及国内繁育。古格尔生物自主搭建了羊驼养殖免疫基地,优选国外进口适龄健康羊驼,可提供相关免疫及纳米抗体开发服务。
纳米抗体特点
单域抗体,又称纳米抗体(nanobody),是一种发现于羊驼、骆驼等骆驼科动物中含有的特殊结构的抗体形式。该抗体与传统正常抗体的重轻链匹配不同,只由重链组成,其恒定区中的CH1区缺失,导致其无法与传统正常抗体中的轻链配对,只包含一个重链可变区(VHH)和两个常规的CH2与CH3。VHH可单独表达,其结构稳定性并能保持结合活性,分子量约为12-15 kD,是目前已知的可结合目标抗原的最小抗体单位。
纳米抗体与正常抗体结构比较图示
① 分子量小12KD,仅为正常抗体的1/10,可穿透血脑屏障
② 氨基酸序列与人同源性达80%以上,抗原决定簇少,免疫原性低
③ 框架区Fr2中较正常抗体由疏水性氨基酸突变为亲水性氨基酸,可溶性高,不易聚集
④ 稳定性好,耐高温、强酸、强碱,应用场景广阔
⑤ CDR3区较正常抗体更长,特异性强,亲和力高,能识别独特结构的隐秘表位
⑥ 可进行原核表达,操作简单,成本低廉
文库构建案例展示
驼源PBMC的RNA提取
R1轮PCR——分离VHH重链抗体与正常重链抗体
R2轮PCR——扩展VHH重链抗体片段
驼源纳米抗体文库阳性率100%
文库序列分析
文库构建完成后,随机挑选单克隆测序,对文库中纳米抗体的多样性进行分析:
筛选案例
技术服务流程
羊驼免疫纳米抗体筛选服务流程 | |||
服务流程 | 内容 | 周期 | 交付 |
免疫方案制定 | 沟通靶点基本信息 确定免疫物种 确定免疫方案 | — | 1.免疫血清 2.PBMC 3.免疫文库 4.筛选抗体序列 5.实验报告 |
mRNA制备 | 基因合成 制备mRNA免疫源 | 2-3周 | |
动物免疫 | 检测血清效价 | 7-8周 | |
文库构建 | 分离PBMC 扩增抗体基因 构建文库质粒 生产抗体文库 | 2周 | |
抗体筛选 | 文库淘选 ELSIA检测阳性克隆 测序分析序列 | 2周 |
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