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天然人源抗体介绍
抗体研究的发展经历了从鼠源抗体,到嵌合抗体,人源化抗体,至全人源抗体等4个阶段,近年来批准和实验批准中的人源化和全人抗体占比不断提高,使用安全性更高的人源来源抗体序列是未来抗体分子研发的大趋势。
全人源抗体序列由于来源于人体,为天然健康个体氨基酸序列,故而免疫原性弱,相比之前的异源抗体毒副作用显著降低。
同时人体内抗体基因重排机制,抗体多样性多大12次方,能够为抗原筛选提供广泛的覆盖性,特异性,以及亲合能力。
抗体研发演变过程图示
天然文库的优势
多样性高,广泛的抗原覆盖:
天然抗体文库包含了未经抗原选择的B细胞受体(BCR)序列,能够覆盖多种抗原表位。由于供体的B细胞经历了天然的V(D)J重排和体细胞超突变,文库中抗体序列的多样性极高。天然抗体文库特别适合针对未知抗原或新抗原的抗体筛选。
无需免疫,节省时间和经济成本:
天然抗体文库直接从健康供体的B细胞中构建,无需经过免疫过程,节省了免疫动物或人的时间和成本。
免疫抗体文库可能因免疫过程中的抗原偏好性而丢失某些抗体序列,而天然抗体文库避免了这种偏差。
天然全人源序列:
天然抗体文库通常来源于人类B细胞,因此筛选出的抗体具有全人源序列,降低了免疫原性风险。
适合治疗性抗体开发,在临床应用中具有更高的安全性和耐受性。
保留抗体天然构象和稳定性:
天然抗体文库中的抗体序列经过自然选择,通常具有更好的折叠稳定性和功能性。
低免疫原性:
由于来源于天然B细胞,筛选出的抗体具有较低的免疫原性,适合临床应用。
快速高通量筛选:
天然抗体文库通常包含大量克隆(10^8~10^11),结合高通量筛选技术,可以快速获得目标抗体。
适用于紧急情况如在应对突发传染病(如COVID-19)时,天然抗体文库可以快速筛选出中和抗体。
文库案例展示
全人源PBMC总RNA提取
全人源scFv抗体库构建第1轮PCR
调取扩增VH和VK、VL基因片段
全人源scFv抗体库构建第2轮PCR
为VH和VK、VL片段添加搭桥片段
全人源scFv抗体库构建第3轮PCR
将VH和VK、VL链搭桥拼接为scFv
文库阳性率检测
运用优化的载体构建方案,保证阳性率100%
序列分析案例展示
抗体文库序列分析图示
文库抗体序列Germline分布统计 重链H-CDR3氨基酸长度分布统计 文库抗体重轻链配对分布统计
技术服务流程
天然人源scFv抗体文库定制服务流程 | |||
服务流程 | 内容 | 周期 | 交付 |
沟通文库信息 | 确定文库多样性 文库库容大小 | — | 1.文库构建实验报告 (包含文库质量参数等文件) 2.抗体文库库容>1×10^9 3. 抗体文库总滴度>1×10^14 4. 细菌库10ml
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PBMC采集 | 客户提供PBMC 或古格尔提供 | — | |
抗体文库构建 | 提取RNA 扩增抗体可变区片段 构建文库质粒 电击转化细菌 生产抗体文库 | 3周 | |
文库质量检测 | 库容大小 文库滴度 插入率 测序分析序列多样性 |
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