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小分子半抗原简介
通常靶点的分子量较小(<1000 Da),将其称为小分子半抗原,原因在于其分子量小、结构简单、单独存在时无法诱导免疫应答反应,即不具备免疫原性。只有将小分子半抗原与大分子蛋白质连接(或者非抗原性等载体)形成小分子-载体复合物,才可获得免疫原性,可诱导免疫应答。
古格尔生物专业打造骆驼/羊驼免疫基地,可为客户提供小分子半抗原免疫及纳米抗体筛选服务。
小分子半抗原设计
小分子由于结构过于简单,无法产生免疫原性,不可直接进行动物免疫。通常做法是连入载体蛋白合成小分子-载体蛋白复合体,形成免疫原性。
抗原设计的要点:
1. 结构修饰:小分子抗原结构过于简单,通常含有环状结构或侧链结构的特征更容易制备出特异性抗体。同时结构简单的小分子需要通过化学修饰引入活性基团(如羧基、氨基),便于与载体蛋白偶联。
2. 维持抗原表位:小分子结构小巧,需要考虑改造后关键表位得到保留,维持免疫识别特性。通常做法是在小分子和载体蛋白之间加入连结臂,其中的连接位点、和小分子的特征基团的避免接近、连结臂的免疫原性是主要的考虑要点。
小分子半抗原-载体蛋白复合物制备图示
技术服务流程
小分子半抗原驼源免疫纳米抗体筛选服务流程 | |||
服务流程 | 内容 | 周期 | 交付 |
免疫方案制定 | 沟通靶点基本信息 确定抗原设计方案 确定免疫方案 | — | 1. 免疫血清 2. PBMC 3. 免疫文库 4. 筛选抗体序列 5. 实验报告 6. 表达5株VHH抗体1mg 7. 抗体表达及检测数据报告 |
抗原制备 | 小分子偶联 载体抗原制备 | 2-3周 | |
动物免疫 | 检测血清效价 | 7-8周 | |
文库构建 | 分离PBMC 扩增抗体基因 构建文库质粒 生产抗体文库 | 2周 | |
抗体筛选 | 文库淘选 ELSIA检测阳性克隆 测序分析序列 | 2周 | |
抗体表达 | 构建表达载体 转染真核细胞生产抗体 抗体蛋白质量检测 | 2周 | |
抗体活性检测 | 抗体水平ELSIA检测结合活性 | 1周 |
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