天然纳米抗体筛选

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全人源纳米抗体sdFv 非抗体支架蛋白Affimer 非重组蛋白免疫纳米抗体开发全人源类抗体TCR VHH+VK/VL杂交库

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纳米抗体简介

单域抗体，又称纳米抗体(nanobody)，是一种发现于羊驼、骆驼等骆驼科动物中含有的特殊结构的抗体形式。该抗体与传统正常抗体的重轻链匹配不同，只由重链组成，其恒定区中的CH1区缺失，导致其无法与传统正常抗体中的轻链配对，只包含一个重链可变区（VHH）和两个常规的CH2与CH3。VHH可单独表达，其结构稳定性并能保持结合活性，分子量约为12-15 kD，是目前已知的可结合目标抗原的最小抗体单位。

纳米抗体与正常抗体结构比较图示

我国骆驼资源丰富，且骆驼在单域抗体中的家族多样性及含量最为丰富，为此古格尔生物倾力打造了数百峰骆驼天然单域抗体文库，为单域抗体免疫方案之外添加新的助力，提高单域抗体优秀分子发现的成功率。

纳米抗体特点

① 分子量小12KD，仅为正常抗体的1/10，可穿透血脑屏障

② 氨基酸序列与人同源性达80%以上，抗原决定簇少，免疫原性低

③ 框架区Fr2中较正常抗体由疏水性氨基酸突变为亲水性氨基酸，可溶性高，不易聚集

④ 稳定性好，耐高温、强酸、强碱，应用场景广阔

⑤ CDR3区较正常抗体更长，特异性强，亲和力高，能识别独特结构的隐秘表位

⑥ 可进行原核表达，操作简单，成本低廉

文库构建案例展示

驼源PBMC的RNA提取

R1轮PCR——分离VHH重链抗体与正常重链抗体

R2轮PCR——扩展VHH重链抗体片段

驼源纳米抗体文库阳性率100%

文库序列分析

文库构建完成后，随机挑选单克隆测序，对文库中纳米抗体的多样性进行分析：

纳米抗体文库序列分析图示

序列进化树比对显示无重复序列；序列比对图主要分析CDR3区氨基酸的多样性

技术服务流程

驼源天然纳米抗体筛选服务流程
服务流程	内容	周期	交付
抗原分析	沟通靶点基本信息设计筛选方案	—	1. 交付抗体序列 2. 抗体筛选实验报告 3. 抗体序列DNA及氨基酸文件 4. 含抗体序列的质粒
抗原接收	收到抗原确认信息启动筛选	—
抗体筛选	进行3-4轮文库淘选挑取单克隆进行ELISA检测及假阳性鉴定	2-3周
序列分析	挑选阳性克隆测序分析测序结果形成unique抗体DNA及氨基酸序列文件	1周