技术服务
小分子半抗原简介
通常靶点的分子量较小（<1000 Da），将其称为小分子半抗原，原因在于其分子量小、结构简单、单独存在时无法诱导免疫应答反应，即不具备免疫原性。只有将小分子半抗原与大分子蛋白质连接（或者非抗原性等载体）形成小分子-载体复合物，才可获得免疫原性，可诱导免疫应答。
通常做法是连入载体蛋白合成小分子-载体蛋白复合体，形成免疫原性。
小分子抗原设计图示
小分子抗原设计的要点：
1. 结构修饰：小分子抗原结构过于简单，通常含有环状结构或侧链结构的特征更容易制备出特异性抗体。同时结构简单的小分子需要通过化学修饰引入活性基团（如羧基、氨基），便于与载体蛋白偶联。
2. 维持抗原表位：小分子结构小巧，需要考虑改造后关键表位得到保留，维持免疫识别特性。通常做法是在小分子和载体蛋白之间加入连结臂，其中的连接位点、和小分子的特征基团的避免接近、连结臂的免疫原性是主要的考虑要点。
sdFv抗体优势
小分子作为抗原时，由于分子量小，结构较为简单，形成的空间结构有限，通常的传统抗体往往由于分子量大、CDR区结构域大，难以有效识别小分子；而纳米抗体分子量为正常抗体的1/10，分子量小空间位阻小，更易于接触小分子；人源抗体中含有VH、VK、VL等3种类型的可变区片段，单独构建抗体文库结构类似于驼源纳米抗体，每个可变区片段能单独形成loop环结构，经古格尔生物验证，SdFv抗体文库具有优异的靶点能力，适用小分子抗体筛选。
抗体种属 | 片段类型 | Germline |
human sdFv | VH | IGVH1-7 |
VK | IGKV1-6 | |
VL | IGLV1-10 | |
驼源 | VHH | IGVH3 |
驼源纳米抗体与人源抗体germline数量比较图示
驼源纳米抗体仅有1种gemeline，人源抗体sdFv类型germline丰度更高
古格尔生物自主构建了大容量全人源sdFv纳米抗体文库，具有VH、VK、VL等多种纳米抗体类型，germline多样性丰富，其分子大小和独特的抗原识别区结构，能更好的识别结合结构细小的小分子半抗原。
技术服务流程
小分子半抗原sdFv抗体筛选服务流程 | |||
服务流程 | 内容 | 周期 | 交付 |
小分子半抗原分析 | 沟通靶点基本信息 确定抗原设计方案 筛选方案设计 | — | 1. 交付10+unique抗体序列 2. 抗体筛选实验报告 3. 抗体序列DNA及氨基酸文件 4. 含抗体序列的质粒 5. 表达5株sdFv抗体1mg 6. 抗体表达及检测数据报告 |
抗原制备 | 小分子偶联 载体抗原制备 | 2-3周 | |
抗体筛选 | 进行3-4轮文库淘选 挑取单克隆进行ELISA检测及假阳性鉴定 | 2-3周 | |
序列分析 | 挑选阳性克隆测序 分析测序结果 形成unique抗体DNA及氨基酸序列文件 | 1周 | |
抗体表达 | 构建表达载体 转染真核细胞生产抗体 抗体蛋白质量检测 | 2周 | |
抗体活性检测 | 抗体水平ELISA检测结合活性 | 1周 | |
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